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Qiagen--從單細胞和有限的樣本中同時擴增全基因組和全轉(zhuǎn)錄組
來源:qiagen
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作者:和諾
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發(fā)布時間: 2014-11-03
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REPLI-G Cell WGA & WTA Kit是唯一能夠同時均一地擴增全基因組擴增和全轉(zhuǎn)錄組的產(chǎn)品，并且使得基因組與來源于非常小量樣本（25–1000個細胞）的轉(zhuǎn)錄組具有直接相關(guān)性。專用的緩沖液和試劑經(jīng)過獨特的、可控的凈化步驟處理，避免REPLI-g擴增污染核酸。創(chuàng)新的裂解液可以有效地穩(wěn)定細胞核酸，從而確?；蚪MDNA和RNA水平準(zhǔn)確表現(xiàn)?；蚪MDNA和總RNA或mRNA（poly A +）的無偏差擴增采用創(chuàng)新的多重置換擴增（MDA）技術(shù)和新穎的REPLI-g SensiPhi DNA聚合酶來實現(xiàn)。不同于基于PCR的擴增技術(shù)，MDA具有增加高達1000倍的高保真率，避免了假陽性或陰性結(jié)果出現(xiàn)。
REPLI-g Cell WGA & WTA Kit包含新穎的REPLI-g SensiPhi DNA Polymerase，以及用于從25–1000個細胞或相當(dāng)量的樣本中同時擴增全基因組擴增和全轉(zhuǎn)錄組的優(yōu)化緩沖液和試劑。經(jīng)過高效的細胞裂解后，（徹底去除基因組DNA，之后進行靈敏的逆轉(zhuǎn)錄），該試劑盒采用多重置換擴增（MDA）技術(shù)完整地、無偏差地擴增基因組DNA和cDNA。
二.適用于多種研究領(lǐng)域
REPLI-g Cell WGA & WTA Kit 可以直接從細胞中有效擴增gDNA和cDNA，并且可以與經(jīng)常在臨床研究分析中出現(xiàn)的各種樣本一起使用，包括腫瘤細胞、干細胞、分選細胞或其它小量樣本。
不適用于小核酸（例如）：
tRNAs和miRNAs；高度降解的DNA或RNA
* 如果要進行二代測序，則應(yīng)了解超過90％的片段來自于rRNA；因此，轉(zhuǎn)錄組測序前必須進行總RNA擴增。如擴增富集mRNA（poly A +）RNA時省略反應(yīng)中的隨機引物，rRNA的擴增反應(yīng)則不會發(fā)生。
性能
一.完整覆蓋基因組和轉(zhuǎn)錄組，實驗可靠REPLI-g Cell WGA & WTA Kit包含新穎的REPLI-g SensiPhi DNA Polymerase，以及用于從25–1000個細胞或相當(dāng)量的樣本中同時擴增全基因組擴增和全轉(zhuǎn)錄組的優(yōu)化緩沖液和試劑。經(jīng)過高效的細胞裂解后，（徹底去除基因組DNA，之后進行靈敏的逆轉(zhuǎn)錄），該試劑盒采用多重置換擴增（MDA）技術(shù)完整地、無偏差地擴增基因組DNA和cDNA。
二.適用于多種研究領(lǐng)域
REPLI-g Cell WGA & WTA Kit 可以直接從細胞中有效擴增gDNA和cDNA，并且可以與經(jīng)常在臨床研究分析中出現(xiàn)的各種樣本一起使用，包括腫瘤細胞、干細胞、分選細胞或其它小量樣本。
應(yīng)用
REPLI-g Cell WGA & WTA Kit允許從一個非常小量的樣本開始對全部轉(zhuǎn)錄物和基因組進行均一的平行擴增。利用該試劑進行的gDNA和cDNA平行擴增非常適用于二代測序技術(shù)（包括DNA-Seq和RNA-Seq*）、芯片分析、基因分型檢測應(yīng)用、或定量PCR。不適用于小核酸（例如）：
tRNAs和miRNAs；高度降解的DNA或RNA
* 如果要進行二代測序，則應(yīng)了解超過90％的片段來自于rRNA；因此，轉(zhuǎn)錄組測序前必須進行總RNA擴增。如擴增富集mRNA（poly A +）RNA時省略反應(yīng)中的隨機引物，rRNA的擴增反應(yīng)則不會發(fā)生。
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